江苏省水生甲壳动物病害重点实验室

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中华绒螯蟹螺原体的磷脂酶的鉴定以及功能的研究

中华绒螯蟹螺原体是中华绒螯蟹的颤抖病的病原体,这个病原的分子致病机制一直以来尚未研究清楚。中华绒螯蟹螺原体能够入侵3T6细胞,在入侵过程中,需要化学的、物理的或者酶等方式破坏宿主细胞的细胞膜。在本次研究中,我们系统的鉴定了中华绒螯蟹螺原体的磷脂酶lysoPL。这个磷脂酶基因被克隆、测序以及在大肠杆菌BL21 (DE3)中表达。酶活性实验揭示了纯化和重组后的SE-LysoPL在 pH7和30度的温度下,水解酯酶酰基。通过Western blot分析发现SE-LysoPL主要分布在膜蛋白和细胞质蛋白中。在SE-LysoPL毒理实验中,发现中华绒螯蟹螺原体致病能力在感染的早起阶段能够被SE-LysoPL抗体抑制。这是首次鉴定和描述了中华绒螯蟹中的磷脂酶基因,并且具有酯酶活性。本次研究也表明了SE-LysoPL 在中华绒螯蟹螺原体致病过程中的重要作用。

      该研究成果于2017年发表于Microbiology》杂志

17 Identification of lysophospholipase protein from Spiroplasma eriocheiris and verification of its function_页面_01.jpg

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